ASSEGNISTA
valentino.guastaferro(AT)ipsp.cnr.it
pubblicazioni: Orcid
profilo personale e attività: People
Curriculum Vitae
Durante la mia tesi magistrale mi sono focalizzato sullo studio dell’interazione benefica tra Trichoderma – Brachypodium Distachyon attraverso approccio molecolare. In particolare, la porzione epigea ed ipogea, prese separatamente dalla pianta, sono state utilizzate allo scopo di estrarre RNA e di sequenziarlo. L’ analisi di dati RNA-Seq ha condotto all’individuazione dei geni up- e down-regolati durante l’interazione della pianta con due ceppi diversi di Trichoderma. Questo lavoro ha lo scopo di individuare geni da utilizzare per generare piante transgeniche che risultino maggiormente produttive. Durante invece il mio dottorato di ricerca, mi sono focalizzato sullo studio del sensing dell’ospite nel fungo fitopatogeno Fusarium oxysporum attraverso approccio molecolare. In particolare, mediante confronti con banca dati, sono stati individuati diversi geni deputati alla percezione delle superfici nel genoma di Fusarium. Attraverso un approccio di genetica inversa abbiamo poi sostituito nel genoma di Fusarium i geni Ham7, CDC42, Wsc1 o Mid1 con una cassetta di resistenza antifungina, mediante l’uso della tecnica Split-Marker. I mutanti knock-out ottenuti sono stati poi testati per la loro virulenza in piante di pomodoro e nella regolazione di diversi tratti correlati alla virulenza tra cui: risposta allo stress, agglutinazione ifale, adesione al tessuto ospite, penetrazione, sensing delle superfici. In seguito, i mutanti knock-out sono stati nuovamente trasformati allo scopo di esprimere a livello citoplasmatico la proteina GFP per effettuare studi di microscopia confocale in dispositivi micro e nanofluidici sia presso Institute Jacques Monod – Cnrs University Paris City sia in sede. Infine, dai mutanti knock-out sono stati generati i complementati così da essere certi che i fenotipi osservati siano realmente correlati all’assenza del gene considerato.